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使用凝膠色譜柱進行分離的過程是什么樣的

發布時間:2023-09-08瀏覽:63次

  凝膠色譜柱也被稱為分子篩柱或凝膠過濾柱,是一種常用的色譜柱,用于根據分子大小分離和純化樣品中的生物大分子。它基于溶液中大分子與凝膠顆粒之間相互作用的差異來實現分離。TSK GEL HHR系列裝填有粒徑為5μm的苯乙烯二乙烯基苯共聚物填料,該類色譜柱又優良的溶劑可置換性和耐用性。TSK GEL G2000HHR高使用溫度可到60℃。


  使用凝膠色譜柱進行分離的過程如下:

  樣品加載:將待測樣品以溶液形式加載到色譜柱上,樣品中的生物大分子會進入凝膠顆粒的孔隙中。

  分離過程:在柱中,較大的生物大分子由于體積較大而無法進入凝膠顆粒的內部,從而通過柱床快速流出;而較小的生物大分子會進入凝膠顆粒的孔隙中,因此在柱中停留的時間較長。

  提取純化:根據分子的大小,通過逐步洗脫柱床,收集到不同分子大小的組分。較大的分子會首先洗脫,而較小的分子則在較后的洗脫過程中被收集。

  凝膠色譜柱的優點包括:

  分子選擇性:通過調整凝膠顆粒的孔隙大小和性質,可以選擇性地分離目標生物大分子。

  不需高壓:相對于其他色譜技術,操作簡單,無需高壓。

  保持活性:由于色譜柱在分離過程中使用柔軟的凝膠材料,因此生物大分子的活性可以被更好地保持。

  凝膠色譜柱的填料是由多孔性凝膠顆粒構成,這些顆??梢跃哂胁煌目紫洞笮『团帕蟹绞?,以實現對大分子的分離。常用的凝膠材料包括瓊脂糖、聚乙二醇、聚丙烯酰胺等。為了獲得高質量的分離結果,選擇合適的填料材料和柱尺寸非常重要。此外,凝膠柱的操作和儲存應遵循生產商提供的說明書或建議,并且對于每次使用前都應進行柱的再平衡和校正。

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